Evaluation of the AmpliVue® C. difficile MDx POC test from Quidel at the National Reference Center for Clostridium difficile in France

May 28, 2015

CENTRE NATIONAL DE RÉFÉRENCE DE CLOSTRIDIUM DIFFICILE, PARIS

QUIDEL®, AMPLIVUE® C.DIFFICILE

Interview mit Dr. Frédéric Barbut, Leiter des Nationalen Referenzlabors Frankreichs für Clostridium difficile

Die Firma BÜHLMANN hat Sie als Verantwortlichen des Nationalen Referenzlabors Frankreichs für Clostridium difficile gebeten, den neuen molekularbiologischen Schnelltest AmpliVue® C. difficile von QUIDEL® zu evaluieren. Der Test ermöglicht die Detektion der Toxin-produzierenden C. difficile Stämme A+B+ und A-B+ in Stuhlproben mit der isothermalen Amplifikationstechnologie.

saint-antoineparis-universitas

Wie haben Sie den neuen Test evaluiert? (Vergleichsmethode, Anzahl und Probentyp, etc.)

Das Clostridium difficile Labor, das zum Nationalen Referenzlabor für anaerobe Bakterien gehört, hat den Schnelltest AmpliVue® C. difficile im Jahr 2013 getestet. Dieser Test detektiert ein konserviertes Fragment des Gens für das Toxin A, das per Helicase-Dependent Amplification vervielfältigt wird. Die Evaluation wurde mit 308 Stuhlproben von Patienten mit Verdacht auf C. difficile Infektion durchgeführt. Wir haben die AmpliVue® Ergebnisse mit toxigener Kultur vergleichen, die als Referenzmethode gilt. Zusätzlich haben wir parallel dazu einen zweistufigen Testalgorithmus getestet: Antigentest (Glutamate-Dehydrogenase, GDH) und Bestätigung der positiven Ergebnisse mit einem molekularbiologischen Test (Illumigene, Meridian). Bei diskordanten Ergebnissen wurden zusätzliche Tests durchgeführt (Kultur, Testwiederholung).

Was können Sie zu den Ergebnissen sagen?
Von den 308 untersuchten Stuhlproben waren 11,7% positiv in der toxigenen Kultur. Der AmpliVue® C. difficile Schnelltest hat vier ungültige Ergebnisse (1,3%) gezeigt, von denen bei der Testwiederholung nur eine einzige Probe (0,3%) ungültig geblieben ist. Im Vergleich mit der toxigenen Kultur und nach Auflösung der diskrepanten Ergebnisse lag die Sensitivität vom AmpliVue® C. difficile Test bei 91.7% (IC95% 76,4-97,8%), die Spezifität lag bei 100% (IC 95% 98,3-100%). Die Werte des zweistufigen Algorithmus (GDH + Illumigene) waren identisch.

Was ist Ihre Bewertung dieser Ergebnisse des Tests, wohlweislich, dass Sie als Verantwortlicher des Nationalen Referenzzentrums zur Neutralität verpflichtet sind?

Der Schnelltest AmpliVue® C. difficile gehört zu einer neuen Generation von molekularbiologischen Tests. Im Unterschied zu einer Vielzahl anderer molekularbiologischer Tests basiert er auf der Detektion von einem sehr konservierten Fragment des Toxin-A-Gens. Die Einzigartigkeit dieses Tests liegt in der Auswertung der Amplifikation als Bande wie bei einem Streifentest. Die Ergebnisse sind daher sehr einfach zu interpretieren. Daneben ist die Anwendung des Tests sehr einfach und schnell in der Durchführung.

Wie beurteilen Sie die Testprozedur vom QUIDEL AmpliVue® C. difficile?

Die technische Leistungsfähigkeit vom AmpliVue® C. difficile Schnelltest (Sensitivität, Spezifität) sind gut und den meisten molekularbiologischen Tests ebenbürtig. Seine Implementierung im Labor ist einfach und die nötigen Investitionen für Laborequipment sind sehr überschaubar. Der Test ermöglicht es ausserdem die Analyse nach Anfrage zu starten und das Ergebnis am selben Tag an die Ärzte auszugeben. Die Schnelligkeit ist sehr wichtig, um die Behandlung der Patienten optimal zu gestalten und ermöglicht es, frühzeitig geeignete Vorkehrungen zu treffen, um die weitere Verbreitung zu verhindern.

Wie zufrieden sind Sie mit dem Service von BÜHLMANN?

Wir sind sehr zufrieden mit dem Service von BÜHLMANN. Der wiederholte Austausch mit den Mitarbeitern hat immer sehr gut funktioniert. BÜHLMANN hat sich die Zeit genommen, uns vor Ort die Tests zu zeigen und alle unsere Fragen zu beantworten. Besonders hervorzuheben ist dabei die Schnelligkeit, mit der unsere unterschiedlichsten Anfragen beantwortet wurden.

 

CENTRE NATIONAL DE RÉFÉRENCE DE CLOSTRIDIUM DIFFICILE, PARIS

QUIDEL®, AMPLIVUE® C.DIFFICILE

Dr Frédéric Barbut, responsable du Centre National de Référence de Clostridium difficile, Paris avec son équipe.

saint-antoineparis-universitas

ENTRETIEN AVEC DR FRÉDÉRIC BARBUT, RESPONSABLE DU CENTRE NATIONAL DE RÉFÉRENCE DE CLOSTRIDIUM DIFFICILE, PARIS

Nous vous avons sollicités en tant que responsables du Centre National de Référence pour la détection de Clostridium difficile, pour évaluer le nouveau test rapide de biologie moléculaire, AmpliVue® C.difficile de QUIDEL®. Ce test permet de détecter les souches toxinogènes A+B+ et A-B+ de Clostridium difficile à partir des selles avec une technologie d’amplification isothermique.

Comment avez-vous évalué ce nouveau test ? (méthode comparative, nombre et type d’échantillons, etc.)

Le laboratoire Clostridium difficile associé au CNR des bactéries anaérobies a évalué en 2013 le test moléculaire AmpliVue® C.difficile. Ce test détecte un fragment conservé du gène de la toxine A de Clostridium difficile par amplification isotherme hélicase dépendante. L’évaluation a été réalisée à partir de 308 échantillons de selles fraiches de patients suspectés d’infections à C. difficile. Nous avons comparé les résultats d’AmpliVue® à ceux obtenus par la culture toxigénique qui est une méthode de référence. De plus, nous avons analysé en parallèle les performances d’un algorithme de diagnostic en deux temps : dépistage d’un antigène spécifique (glutamate déshydrogénase, GDH) et confirmation des résultats positifs par un test d’amplification moléculaire (Illumigene®, Meridian). En cas de résultats discordants entre le test de référence et le test AmpliVue C.difficile, des tests complémentaires (culture enrichie, répétition des tests) ont été réalisés.

Que pouvez-vous dire des résultats obtenus ?

Sur les 308 échantillons de selles diarrhéiques étudiées, 11.7 % étaient positifs par la culture toxigénique. Le test AmpliVue® C.difficile a donné 4 résultats invalides (1.3%), dus à l’absence de bande contrôle et de bande test en première intention : 1 seul (0.3%) s’est révélé ininterprétable après répétition du test. Comparé à la culture toxigénique et après résolution des résultats discordants, la sensibilité et la spécificité du test AmpliVue® C.difficile étaient respectivement de 91.7% (IC95% 76.4-97.8%) et de 100% (IC 95% 98.3-100%). Les performances techniques de l’algorithme en deux temps (GDH + Illumigene) étaient identiques.

Compte-tenu de votre responsabilité au sein du CNR et de la réserve qui en en découle, quelles sont vos conclusions sur les performances de ce test ?

Le test AmpliVue® C.difficile fait partie des tests moléculaires de nouvelle génération. A la différence de nombreux tests moléculaires, il met en évidence un fragment très conservé du gène de la toxine A. L’originalité de ce test, outre sa simplicité et sa rapidité d’exécution, réside dans la détection visuelle des amplicons qui se fait sur bandelette. Les résultats sont donc faciles à interpréter.

Comment qualifieriez-vous l’utilisation du test QUIDEL® AmpliVue® C.difficile ?

Les performances techniques de AmpliVue® C.difficile (sensibilité, spécificité) sont bonnes et équivalentes à la plupart des méthodes de biologie moléculaire. Son implantation dans un laboratoire est facile et l’investissement en équipement très limité. De plus, le test moléculaire AmpliVue® C.difficile permet de réaliser des examens à la demande et de rendre le jour même au clinicien un résultat. La rapidité de diagnostic est importante pour optimiser le traitement des patients et pour mettre en place les précautions « contact ».

Dans quelle mesure êtes-vous satisfaits du service de BÜHLMANN ?

Nous ne pouvons qu’être satisfaits des services de BÜHLMANN. Les différents échanges que nous avons eus avec l’équipe se sont toujours très bien passés. BUHLMANN a pris le temps de venir nous montrer la méthode et de répondre à toutes nos questions. Il faut également souligner la réactivité des interlocuteurs aux diverses demandes qui ont pu être faites.

Evaluation of the AmpliVue® C. difficile MDx POC test from Quidel at the National Reference Center for Clostridium difficile in France

May 28, 2015

CENTRE NATIONAL DE RÉFÉRENCE DE CLOSTRIDIUM DIFFICILE, PARIS

QUIDEL®, AMPLIVUE® C.DIFFICILE

Interview mit Dr. Frédéric Barbut, Leiter des Nationalen Referenzlabors Frankreichs für Clostridium difficile

Die Firma BÜHLMANN hat Sie als Verantwortlichen des Nationalen Referenzlabors Frankreichs für Clostridium difficile gebeten, den neuen molekularbiologischen Schnelltest AmpliVue® C. difficile von QUIDEL® zu evaluieren. Der Test ermöglicht die Detektion der Toxin-produzierenden C. difficile Stämme A+B+ und A-B+ in Stuhlproben mit der isothermalen Amplifikationstechnologie.

 

Wie haben Sie den neuen Test evaluiert? (Vergleichsmethode, Anzahl und Probentyp, etc.)

Das Clostridium difficile Labor, das zum Nationalen Referenzlabor für anaerobe Bakterien gehört, hat den Schnelltest AmpliVue® C. difficile im Jahr 2013 getestet. Dieser Test detektiert ein konserviertes Fragment des Gens für das Toxin A, das per Helicase-Dependent Amplification vervielfältigt wird. Die Evaluation wurde mit 308 Stuhlproben von Patienten mit Verdacht auf C. difficile Infektion durchgeführt. Wir haben die AmpliVue® Ergebnisse mit toxigener Kultur vergleichen, die als Referenzmethode gilt. Zusätzlich haben wir parallel dazu einen zweistufigen Testalgorithmus getestet: Antigentest (Glutamate-Dehydrogenase, GDH) und Bestätigung der positiven Ergebnisse mit einem molekularbiologischen Test (Illumigene, Meridian). Bei diskordanten Ergebnissen wurden zusätzliche Tests durchgeführt (Kultur, Testwiederholung).

Was können Sie zu den Ergebnissen sagen?
Von den 308 untersuchten Stuhlproben waren 11,7% positiv in der toxigenen Kultur. Der AmpliVue® C. difficile Schnelltest hat vier ungültige Ergebnisse (1,3%) gezeigt, von denen bei der Testwiederholung nur eine einzige Probe (0,3%) ungültig geblieben ist. Im Vergleich mit der toxigenen Kultur und nach Auflösung der diskrepanten Ergebnisse lag die Sensitivität vom AmpliVue® C. difficile Test bei 91.7% (IC95% 76,4-97,8%), die Spezifität lag bei 100% (IC 95% 98,3-100%). Die Werte des zweistufigen Algorithmus (GDH + Illumigene) waren identisch.

Was ist Ihre Bewertung dieser Ergebnisse des Tests, wohlweislich, dass Sie als Verantwortlicher des Nationalen Referenzzentrums zur Neutralität verpflichtet sind?

Der Schnelltest AmpliVue® C. difficile gehört zu einer neuen Generation von molekularbiologischen Tests. Im Unterschied zu einer Vielzahl anderer molekularbiologischer Tests basiert er auf der Detektion von einem sehr konservierten Fragment des Toxin-A-Gens. Die Einzigartigkeit dieses Tests liegt in der Auswertung der Amplifikation als Bande wie bei einem Streifentest. Die Ergebnisse sind daher sehr einfach zu interpretieren. Daneben ist die Anwendung des Tests sehr einfach und schnell in der Durchführung.

Wie beurteilen Sie die Testprozedur vom QUIDEL AmpliVue® C. difficile?

Die technische Leistungsfähigkeit vom AmpliVue® C. difficile Schnelltest (Sensitivität, Spezifität) sind gut und den meisten molekularbiologischen Tests ebenbürtig. Seine Implementierung im Labor ist einfach und die nötigen Investitionen für Laborequipment sind sehr überschaubar. Der Test ermöglicht es ausserdem die Analyse nach Anfrage zu starten und das Ergebnis am selben Tag an die Ärzte auszugeben. Die Schnelligkeit ist sehr wichtig, um die Behandlung der Patienten optimal zu gestalten und ermöglicht es, frühzeitig geeignete Vorkehrungen zu treffen, um die weitere Verbreitung zu verhindern.

Wie zufrieden sind Sie mit dem Service von BÜHLMANN?

Wir sind sehr zufrieden mit dem Service von BÜHLMANN. Der wiederholte Austausch mit den Mitarbeitern hat immer sehr gut funktioniert. BÜHLMANN hat sich die Zeit genommen, uns vor Ort die Tests zu zeigen und alle unsere Fragen zu beantworten. Besonders hervorzuheben ist dabei die Schnelligkeit, mit der unsere unterschiedlichsten Anfragen beantwortet wurden.

 

CENTRE NATIONAL DE RÉFÉRENCE DE CLOSTRIDIUM DIFFICILE, PARIS

QUIDEL®, AMPLIVUE® C.DIFFICILE

Dr Frédéric Barbut, responsable du Centre National de Référence de Clostridium difficile, Paris avec son équipe.

 

ENTRETIEN AVEC DR FRÉDÉRIC BARBUT, RESPONSABLE DU CENTRE NATIONAL DE RÉFÉRENCE DE CLOSTRIDIUM DIFFICILE, PARIS

Nous vous avons sollicités en tant que responsables du Centre National de Référence pour la détection de Clostridium difficile, pour évaluer le nouveau test rapide de biologie moléculaire, AmpliVue® C.difficile de QUIDEL®. Ce test permet de détecter les souches toxinogènes A+B+ et A-B+ de Clostridium difficile à partir des selles avec une technologie d’amplification isothermique.

Comment avez-vous évalué ce nouveau test ? (méthode comparative, nombre et type d’échantillons, etc.)

Le laboratoire Clostridium difficile associé au CNR des bactéries anaérobies a évalué en 2013 le test moléculaire AmpliVue® C.difficile. Ce test détecte un fragment conservé du gène de la toxine A de Clostridium difficile par amplification isotherme hélicase dépendante. L’évaluation a été réalisée à partir de 308 échantillons de selles fraiches de patients suspectés d’infections à C. difficile. Nous avons comparé les résultats d’AmpliVue® à ceux obtenus par la culture toxigénique qui est une méthode de référence. De plus, nous avons analysé en parallèle les performances d’un algorithme de diagnostic en deux temps : dépistage d’un antigène spécifique (glutamate déshydrogénase, GDH) et confirmation des résultats positifs par un test d’amplification moléculaire (Illumigene®, Meridian). En cas de résultats discordants entre le test de référence et le test AmpliVue C.difficile, des tests complémentaires (culture enrichie, répétition des tests) ont été réalisés.

Que pouvez-vous dire des résultats obtenus ?

Sur les 308 échantillons de selles diarrhéiques étudiées, 11.7 % étaient positifs par la culture toxigénique. Le test AmpliVue® C.difficile a donné 4 résultats invalides (1.3%), dus à l’absence de bande contrôle et de bande test en première intention : 1 seul (0.3%) s’est révélé ininterprétable après répétition du test. Comparé à la culture toxigénique et après résolution des résultats discordants, la sensibilité et la spécificité du test AmpliVue® C.difficile étaient respectivement de 91.7% (IC95% 76.4-97.8%) et de 100% (IC 95% 98.3-100%). Les performances techniques de l’algorithme en deux temps (GDH + Illumigene) étaient identiques.

Compte-tenu de votre responsabilité au sein du CNR et de la réserve qui en en découle, quelles sont vos conclusions sur les performances de ce test ?

Le test AmpliVue® C.difficile fait partie des tests moléculaires de nouvelle génération. A la différence de nombreux tests moléculaires, il met en évidence un fragment très conservé du gène de la toxine A. L’originalité de ce test, outre sa simplicité et sa rapidité d’exécution, réside dans la détection visuelle des amplicons qui se fait sur bandelette. Les résultats sont donc faciles à interpréter.

Comment qualifieriez-vous l’utilisation du test QUIDEL® AmpliVue® C.difficile ?

Les performances techniques de AmpliVue® C.difficile (sensibilité, spécificité) sont bonnes et équivalentes à la plupart des méthodes de biologie moléculaire. Son implantation dans un laboratoire est facile et l’investissement en équipement très limité. De plus, le test moléculaire AmpliVue® C.difficile permet de réaliser des examens à la demande et de rendre le jour même au clinicien un résultat. La rapidité de diagnostic est importante pour optimiser le traitement des patients et pour mettre en place les précautions « contact ».

Dans quelle mesure êtes-vous satisfaits du service de BÜHLMANN ?

Nous ne pouvons qu’être satisfaits des services de BÜHLMANN. Les différents échanges que nous avons eus avec l’équipe se sont toujours très bien passés. BUHLMANN a pris le temps de venir nous montrer la méthode et de répondre à toutes nos questions. Il faut également souligner la réactivité des interlocuteurs aux diverses demandes qui ont pu être faites.